Prueba de antiglobulina directa

prueba de antiglobulina, también conocida como prueba de Coombs, es una herramienta de diagnóstico empleado con frecuencia que se utiliza para la detección de trastornos inmunohematológicos e inmunológicos. Basado en la técnica y los objetivos, hay dos variedades de pruebas de antiglobulina: la prueba de antiglobulina directa (DAT) / prueba directa de Coombs (DCT), y la prueba de antiglobulina indirecta (IAT). Es imprescindible mencionar que la prueba de antiglobulina directa se utiliza para detectar un tipo especial de anemia que es causada por un funcionamiento anormal del sistema inmunológico. El cuerpo humano está equipado para producir anticuerpos para identificar y atacar patógenos extraños. Sin embargo, en algunos casos, el sistema inmunológico sintetizar anticuerpos que se dirigen y matar a las células rojas de la sangre (glóbulos rojos o en nuestro cuerpo) para causar anemia hemolítica.

¿Cuándo es necesario tomar una prueba de antiglobulina directa?

Cuando su médico no está seguro de si los anticuerpos se unen a los glóbulos rojos, prueba de antiglobulina directa puede ayudar en tal situación. escenarios comunes donde el médico puede recomendar la prueba de antiglobulina directa incluyen: indicaciones post-transfusión de anemia hemolítica y recién nacidos a veces el diagnóstico si la madre ha desarrollado anticuerpos contra los glóbulos rojos fetales y se la pasó al bebé durante la vida intrauterina. Si no se detectan, las posibilidades de desarrollar enfermedades potencialmente mortales como la enfermedad hemolítica del recién nacido que aumenta de manera significativa.

anemias hemolíticas son por lo general debido a la hiperactivación del sistema inmune que conduce a la formación de anticuerpos contra el propio RBCs del cuerpo, que también se conoce como anemia hemolítica autoinmune. Y los síntomas pueden incluir:

• Dificultad para respirar
• La falta de energía y aumentar la sensación de cansancio
• orina oscura e ictericia
• recuento bajo de glóbulos rojos en los análisis de sangre
• extremidades frías incluyendo manos y pies
• problemas cardiacos, tales como soplo en el corazón o el fracaso, y el corazón irregulares

¿Cómo se realiza la prueba de antiglobulina directa?

Principio de trabajo del DAT

prueba de antiglobulina directa ayuda a detectar el recubrimiento anticuerpo in vivo de las células rojas de la sangre (los anticuerpos podrían ser IgG o complemento o ambos). En corriente de la sangre, los glóbulos rojos tienen ciertos antígenos que ofrecen sitios de unión a anticuerpos. Cualquier gatillo o respuesta que puede activar estos sitios de unión pueden estimular los síntomas de la anemia hemolítica. Esta es la base de HDN (enfermedad hemolítica de los recién nacidos), anemia hemolítica autoinmune y reacción a la transfusión. La activación y revestimiento también puede ser causado debido a ciertos medicamentos.

En este ensayo, las células rojas de la sangre se lavan y después se incubaron con suero humano. Esta técnica permite que los anticuerpos para obtener unen a los antígenos de RBC. El proceso implica entonces lavado y adición de globulina anti-humana. Si la aglutinación se produce después de la adición de globulina anti-humano (a veces conocido como reactivo de Coombs), entonces es una señal de recubrimiento anticuerpo sobre las células in vivo. Es imperativo mencionar que tanto los anticuerpos IgM IgG y pueden ser detectados mediante el uso de esta prueba.

Técnicas de DAT

1. Tome RBCs de pacientes a partir de una EDTA (ácido etilendiaminotetraacético), que garantiza la muestra se anticoagulada.
2. Dispense una gota de suspensión de RBC (2% -5%) por separado en cada uno de los 4 tubos de ensayo, y la etiqueta de los 4 tubos con las etiquetas: Poly, control, anti-IgG y anti-C3.
3. Lavar los eritrocitos con solución salina, y después inclinar el tubo boca abajo para decantar la solución salina. A continuación, desactive las partes inferiores de los tubos con la solución salina a la izquierda, y repetir esta operación para 3 a 4 veces. Secar los tubos con un absorbente limpie.
4. Añadir dos gotas de poliespecıfico en el AHG "escuela politécnica" tubo, y dispensar dos gotas de 6% de BSA a la "Controlar" tubo.
5. Agitar suavemente para mezclar los contenidos en los tubos, y los glóbulos rojos en cada tubo formarán un gránulo o un botón que se haga la prueba de aglutinación. Registrar los resultados.
6. Si el reactivo poliespecífica muestra resultados positivos, se necesitarán pruebas específicas con reactivos anti-C3 anti-IgG para identificar el revestimiento celular, si se trata de anticuerpo o complemento o ambos.
7. Dispensar 2 gotas de anti-IgG AHG a la "anti-IgG" tubo, y 2 gotas de anti-C3 AHG a la "anti-C3" tubo. Agitar para combinar el contenido.
8. La prueba tiene que ser muy sensible, por lo que tendremos que incube todos los aspectos negativos durante 5 minutos para recubrimiento mejorado. Para detectar la debilidad en el revestimiento, observar todos los negativos con el microscopio.
9. Si el tubo superior de color rojo se ha utilizado para la recogida de la muestra, a continuación, los resultados falsos positivos podrían venir.

• Cuando la coagulación ocurre o se enfría, es debido a la debilidad en auto-anticuerpos de acción frías incluyendo anti-I, la condición tiene lugar en In-Vitro complemento.
• Evitar tubo lavanda-top para atar los iones de calcio y de magnesio.
• Evitar la activación del complemento in vitro.

10. En caso de DAT positivo, obtener información sobre los siguientes pacientes:

• El diagnóstico de ciertas enfermedades
• medicación adecuada
• Antecedentes de transfusión de los glóbulos rojos y los componentes del plasma
• Otras pruebas que indican que la destrucción de los glóbulos rojos

Para obtener más información acerca de la DAT y IAT, ver el vídeo a continuación:

Cómo interpretar los resultados de la prueba

Sabemos que los anticuerpos se unen a los glóbulos rojos cuando DAT es positivo. El grado de positividad depende de la fuerza de DAT y al mismo tiempo la cantidad de anticuerpos unidos. Pero si los glóbulos rojos se destruyen ya, esta situación no siempre se relacionan con la gravedad. En la prueba de antiglobulina directa, los anticuerpos se detectan sin identificar la causa y el tipo de anemia hemolítica. Para averiguar las razones detrás de él, la historia clínica debe ser observado y el examen médico tiene que ser llevado a cabo, por ejemplo, la historia de la transfusión, reacción a fármacos, etc.

Es importante mencionar que un pequeño segmento de la población a prueba DAT positivo sin experimentar o manifestar signos de anemia hemolítica. Si DAT es negativo, se sugiere que los anticuerpos no se unen a los glóbulos rojos. Por lo tanto, otras causas pueden ser detectados e investigados.

Algunas situaciones en las que es positivo DAT son:

• La anemia hemolítica autoinmune (debido a la hiperactividad del sistema inmunitario contra los glóbulos rojos)
• Desarrollo de anticuerpos en los glóbulos rojos, la condición se llama "la toxicidad del fármaco". Es causada por algunos medicamentos que incluyen cefalosporinas, Levopoda, dapsona, nitrofurantoína, los AINE, como ibuprofeno
• Cuando la sangre donada es atacado por el sistema inmune (como parte de reacción a la transfusión)
• Los tipos de sangre de la madre y el niño son diferentes
• Leucemia incluyendo leucemia linfocítica crónica
• Un problema autoinmune llamada lupus
• Mononucleosis
• Sífilis
• La infección por micoplasma.

A veces los resultados de la prueba de antiglobulina directa puede ser imposible, incluso sin ningún tipo de enfermedad o riesgo. Además, la prueba puede ser interrumpida por algunos medicamentos y algunos pueden causar los resultados positivos sin tener anemia hemolítica. Algunos medicamentos que pueden causar anemia hemolítica son:

• algunos antibióticos
• Insulina
• Algunos medicamentos para la presión de la sangre en particular